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ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中樣品的稀釋
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)查看樣品的要素是試驗(yàn)要點(diǎn)之一。
有些用戶未能?chē)?yán)峻按運(yùn)用說(shuō)明書(shū)操作,如某些產(chǎn)品應(yīng)取10μl樣品進(jìn)行稀釋,單個(gè)用戶取5μl甚至1μl樣品進(jìn)行稀釋,由于吸嘴上不可防止地沾有樣品以及微量移液器的精度不行,因此構(gòu)成樣品稀釋倍數(shù)不,查看效果出現(xiàn)疑問(wèn)。
elisa試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可運(yùn)用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
封板膜只限一次性運(yùn)用,以防止交叉污染。
底物請(qǐng)避光保存。
一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,舉薦運(yùn)用排槍加樣。
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)每次測(cè)定的一同做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。
依據(jù)技術(shù)員的研討與發(fā)現(xiàn),正本ELISA試劑盒的樣品稀釋還有這等講究……我們以血清樣品為例,酶聯(lián)免疫反應(yīng)是一種敏感性很高的反應(yīng),假設(shè)血清不稀釋,不可防止會(huì)發(fā)生很強(qiáng)的非特異性反應(yīng),出現(xiàn)假陽(yáng)性。
各步加樣均應(yīng)運(yùn)用加樣器,并常常校正其性,以防止試驗(yàn)差錯(cuò)。
國(guó)外查看血清抗體的試劑盒,均規(guī)定將血清稀釋至恰當(dāng)?shù)谋稊?shù),以降低非特異性反應(yīng),使特異性的抗原抗體反應(yīng)充分體現(xiàn)出來(lái)。
一般產(chǎn)品的樣品稀釋倍數(shù)均經(jīng)過(guò)許多試驗(yàn)判定,ELISA試劑盒以確保試驗(yàn)的靈敏度和特異性。
濃洗刷液也許會(huì)有結(jié)晶分出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗刷時(shí)不影響效果。
ELISA試劑盒標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔孔的OD值),elisa試劑盒請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋必定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,核算時(shí)請(qǐng)終究乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。